超微量分光光度計之所以能檢測微量樣品的原液無需稀釋,是因為可以通過調節液滴的光程,從而進行了“光程稀釋”的作用。光程越小,可檢測的樣品濃度越高(需一定限制內,處于朗伯-比爾定律線性范圍內)。這一過程可通過液柱、液膜等形式實現,設備具有一個關鍵部件即-光程調節器。
光程調節器對應檢測方法為樣品拉伸法(液柱法)。通??汕袚Q2-5個光程,通過下部元件一定的機械結構運動,如轉動,使上部元件進行高低切換,使液柱的高度改變,調節光程。此結構是否需要校準/調整,取決于下部元件的設計,如為馬達等部件,則需要校準。值得注意的是,此類切換器的上部原件暴露在外,需要注意清潔,避免灰塵及紙屑落入夾縫,否則將導致光程的較大偏差。
超微量分光光度計與傳統分光光度計相比,其所需樣品體積小,僅需0.5-2μl;無需比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品自動形成液柱,檢測完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可,避免了因為比色皿清洗不凈帶來的交叉污染。
超微量分光光度計一般具有多個光程(電機控制自動選擇),而傳統分光光度計的光程為10 mm,超微量分光光度計樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規分光光度計的50倍。